彗星实验检测DNA损伤

   细胞准备：将细胞悬浮在适当的缓冲液中，并调整细胞浓度。

   制片：在显微镜载玻片上铺上一层低熔点的琼脂糖，然后将细胞悬液与琼脂糖混合后铺在第一层上，最后再覆盖一层琼脂糖。

   细胞裂解：将制片置于裂解液中，通常在4°C下裂解1小时以上，以使细胞膜和核膜破裂，释放出DNA。

   DNA解旋：将裂解后的载玻片放入电泳槽中，用碱性缓冲液处理以解旋DNA。

   电泳：在电泳槽中施加电场，使DNA片段在电场作用下迁移。损伤的DNA片段因为较小而迁移得更快，形成“彗星”头部（密集的DNA片段）和尾部（散开的损伤片段）。

   中和：电泳结束后，用中性缓冲液中和载玻片上的碱性条件。

   染色：使用荧光染料（如乙啶或SYBR Green）对DNA进行染色。

   观察和分析：在荧光显微镜下观察彗星，并使用图像分析软件对彗星的头尾长度、尾部面积等参数进行定量分析。

二、彗星实验的应用：

   环境监测：检测环境中的遗传毒性物质。

   癌症研究：评估肿瘤细胞中的DNA损伤和修复能力。

   药物开发：筛选具有遗传毒性的药物候选物。

   辐射生物学：研究辐射对DNA的损伤效应。

三、注意事项：

   实验过程中应避免DNA的进一步损伤，如避免紫外线照射和化学污染。

   需要严格控制实验条件，包括琼脂糖的浓度、电泳电压和时间等，以确保实验的可重复性。

   应该有适当的对照组，如未处理的细胞或已知DNA损伤剂处理的细胞，以便于比较。

提供信息

1. 细胞类型，客户是否提供细胞；

2. DNA损伤模型构建方法；

3. 彗星图片视野需要几个细胞。

测试价格

1. 细胞株 400/株，贴壁细胞80元培养至6孔细胞量，悬浮细胞100元培养至6孔细胞量；客户提供300/株适应性培养1-2周；

2. 药物处理费用一个药物150元，载体转染费用一个载体60元；

3. 彗星检测试剂盒12T 1440,检测费用 300元/样。

 结果展示